参茸研究
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人参
 
                        作 者:丛登立

摘 要:综述了近年来国内外对人参、西洋参鉴别研究概况,从性状鉴别、显微鉴别、理化学鉴别、分子鉴别等方面进行了系统的介绍,并提出了对未来研究的展望。
关键词:人参西洋参鉴别研究

人参人参为五加科人参属植物Panax ginseng C.A.Mey.的根,西洋参为五加科人参属植物Panax quinquefolium L.的根。味甘、微苦、性凉。补肺降火、益胃生津。主产于美国、加拿大,是我国进口药材的主要品种。我国于七十年代引种,1980年获得成功。近年来西洋参已在东北、北京等十多个省市引种成功,但随着人们对保健。美容、延缓衰老类补品需求的不断增加,西洋参及其制品的消费已成为热点。由于价格昂贵,货源偏紧,市场伪品不断出现,尤以同科同属的人参Panax ginseng C.A.Mey.冒充西洋参为多。二者性味、功能主治。临床应用互不相同,但药材性状、组织结构及化学成分十分相似,容易混淆。国内外学者通过对西洋参及人参的性状特征、显微特征、理化特征、DNA分子标记等进行对比研究,确定了鉴别的要点。

人参1、性状鉴别
  《西洋参》中将酉洋参与人参性状对比描述为:西洋参根茎稍短、主根稍短、主根外皮上端横纹较细,纵纹细密,光滑,皮孔祥疤痕疙瘩较多、断面黄白色,树脂道色深,形成明显“梅花纹”、质地较坚实,较重。密度较大,1.18~1.20g/cm3。气味芳香浓郁,味微苦回甜;人参根茎稍长、主根稍长。主根外皮上端横纹较粗,纵纹深、粗糙,皮孔样疤痕疙瘩较少、断面白色,树脂道色浅,具较细“菊花纹”、质地松泡,较轻、密度较小1.08~1.10g/cm3、气香味首回酣。《中国中药材真伪鉴别图典》中将西洋参描述为:呈长圆锥形、纺锤形或圆柱形。长3~12cm,直径 0.3~ 2cm。芦头除去或残存,表面淡黄褐色或黄白色,较丰满,有细密浅皱或稍瘦瘪。纵皱较深,可见横向环纹及线状栓化疤痕。中下部可见一至数条残断侧根或根痕。质坚,折断面较平坦,略呈角质样,或有小裂隙,略显粉性,白色或淡黄棕色。形成层附近色泽稍深,皮部可见暗黄褐色小斑点。气微而特异,味甘而微苦。将伪制西洋参的人参描述为:呈圆柱形、纺锤形,长3.9~9.2cm。直径0.9~1.5cm,头残存,已除去原支根和须根。表面黄白色,皮粗糙,纵皱纹粗大而明显,有横长的皮孔样突起。质地较松散,折断面平坦,放射状纹理不明显,皮部与木部中心多具裂隙,味淡,稍苦。

人参2、显微鉴别
  《西洋参》中总结西洋参与人参粉末特征区为;西洋参木栓细胞较多,呈4~5角形,厚壁,淡黄棕色、导管网纹较少,多梯纹,少环纹、草酸钙簇晶直径多为10~55μm以45μm较多、淀粉粒单粒呈类三角形、椭圆形或类圆形,直径约 2~14μm。复粒由2~8个单粒复合而成;人参木栓细胞稀少呈多角形,微棕色。导管多网纹、少梯状纹,少螺纹、草酸钙簇晶直径多为20~68μm。淀粉粒单粒碗形,多角形或不规则形,直径约4~20μm,复粒由2~6个单粒复合而成,《实用中药材鉴别检索手册)中总结出西洋参与人参显微特征检索表:西洋参木栓层4~5列,栓内层3~4列,导管直径42μm,复粒淀粉2~4分粒者较多,簇晶直径10~40μm,树脂道2圈;人参木栓层5~6列,栓内层2~3列,导管直径30μm,复粒淀粉偶见,簇晶直径20~60μm,树脂道3~4圈。李翱等通过观察西洋参与人参木栓组织发现酉洋参木栓细胞表面观多为直立型细胞,细胞高与宽之比一般大于1,细胞排列常不整齐,偶见横卧型细胞;人参木栓细胞表面观多为横卧型细胞,细胞高与宽之比一般小于1,细胞排列为砖墙式,少有直立型细胞。张瑜华等报道了利用草酸钙簇晶数对国产西洋参和人参进行显微定量,国产西洋参、生晒参的簇晶数与含量呈显著正相关关系。刘海青等利用西洋参和人参中草酸钙簇晶的形状差异和数目差异,鉴别西洋参与生晒参。西洋参主根横切面本薄壁细胞和木射线细胞几无草酸钙簇晶,粉末中草酸钙簇晶较少,晶瓣多,部分草酸钙簇晶中心部富积晶体,呈菊花状;人参主根横切面本薄壁细胞和木射线细胞中含较多的草酸钙簇晶。粉末中草酸钙簇晶较多,晶瓣较少。

人参3、理化鉴别
  《中华人民共和国药典中药薄层色谱彩色图集》记述西洋参不含人参皂苷Rf含F11;人参不含人参皂苷F11,含Rf可作为西洋参与人参的鉴别依据。用氯仿-醋酸乙酯-甲醇-水(15:40: 22:10)(S-1)10℃以下放置的下层溶液展开,人参皂甙Rf位于Rg1的上方;用氯仿-甲醇-水(65:35:10)(S- 2)的下层溶液展开,则人参皂苷Rf位于Rg1的下方。西洋参含的人参皂苷F11方,用S-1展开,F11位于Rf的上方,人参在相应的位置上没有斑点。孙立华等对此作改进,选用一种展开剂一次展开即可,人参的人参皂苷Re、Rg之间有一斑点,而西洋参无此斑点;如果西洋参制剂渗有部分人参,薄层图谱可显两者的叠加图谱,方法较简便快捷。郑友兰等采用Cs-930型双波长薄层扫描法,测定波长525nm,参比波长680nm,以人参皂苷为指标,结果西洋参以人参皂苷Rb1;峰值最高为特征,而人参则以Re峰值最高为特征。曾明等将国产西洋参、生晒参及伪品的蛋白电泳图谱进行比较,将电泳谱带根据染色深浅分为四级:色深者为一级,色浅者为二级,色极浅者为三级,谱带扩散者为扩散带。结果国产西洋参为色深谱带和扩散带各1条,而人参为色深谱带2条,色浅谱带和扩散带各1条。孙非等利用聚内烯酰胺凝胶电泳法,对人参和国产西洋参的超氧化物歧化酶(SOD)。过氧化物酶(POD)和酯酶(ES)同工酶电泳谱进行了比较研究。结果表明,国产西洋参和人参的ES电泳酶谱间无差异;POD电泳酶谱带上有较大的差别,即酶带的数量、酶带的迁移位置。酶带的宽度和酶带的着色深浅程度上均存在差别,ES同工酶谱带完全不同,在人参的ES同工酶酶谱中酶带为墨绿色,而国产西洋参中不存在墨绿色的谱带。朱红宏同样以双波长薄层扫描法对西洋参制剂洋参丸中是否掺有生晒参作鉴定。李义伙等以薄层层析法揭示:人参不含奥克梯隆型假人参皂苷(pseudogin senoside)24(R)-F11,而西洋参则明显含有,因此认为假人参皂苷24(R)-F11是鉴别人参与西洋参的显著标志。《中药材真伪鉴别》西洋参新鲜断面在紫外灯下(254μm)显蓝紫色荧光,人参显蓝色荧光,可资区别。蒋皖芳等对182批西洋参的鉴别检验,展开剂分别为S-l,S-2,结果外观性状鉴别与薄层色谱鉴别相符率为94.0%,因此,西洋参真伪鉴别检验,除每批样品进行性状检验外,还必须做薄层分析,以防止白参掺入或下错结论。李晶晶等对人参和14个产地的15批西洋参样品的皂苷类成分进行薄层定性分析、含量测定,结果西洋参的总皂苷含量,Rb1含量显著高于人参;Rb1在总皂苷中相对含量亦高。刘铁诚介绍了以硅胶柱层析将粗皂苷分离后用高效液相色谱仪做进一步分离和测定,因两者所含化学成份不完全相同,故可做定性鉴别及含量测定。朱钜清在遮光条件下用紫外分析仪照射药材断面,观察荧光色泽。样品断面皮部:西洋参、人参及伪品均显“亮蓝白色”,木部:西洋参显“蓝紫色”,人参与伪品均显“天蓝色”,皮部与木部色泽分层清晰。潘金凤报道了西洋参制剂掺杂人参的薄层鉴定,通过对照人参与西洋参的薄层图谱,人参在人参皂昔Re与Rg1之间有一个紫红色斑点(为人参皂苷Rf),西洋参在人参皂苷Rg1上方有一个紫红色斑点(为人参皂甙F2),其余斑点两者一致。李海生等详细比较了西洋参和生晒参的HPLC图谱,将色谱图按保留时间分为三个区段。第一区段,显著的差别是西洋参中Rb1含量是生晒参的2~5倍;第三区段为21~35分内,西洋参在24.26分和28分左右具有较明显的色谱峰,生晒参则不明显或未检出。李峰等用荧光光谱法对西洋参和人参样品和标准药材对照品进行比较鉴别,固定激发波长254nm,发射波长扫描范围250~700nm。结果西洋参与人参对照品荧光光谱明显不同,人参在345nm处有一个主要特征峰,酉洋参在345nm。410nm处有两个主要特征峰,特别是410nm处的特征峰,是西洋参与人参的主要区别。田进国等对西洋参和人参的石油醚、乙醇和水提取物进行了红外光谱测定,鉴别时可将1720cm与1075cm峰强度差值等于和小于 2.8%T的确定为人参;将该值等于或大于6.5%T的确定为西洋参。邵青以薄层色谱法鉴别了西洋参口服液中是否掺有人参原材料。陈黎报道热重分析法直接测定粉未及其浸出物,方法简便,样品用量少,所得热重曲线区别明显。翁雪平报道一阶导数光谱法鉴别西洋参和人参。吴群报道按《中国药典》方法,对两者进行微量升华实验,在显微镜下观察结晶形状,结果人参升华物结晶为细小短棒状,西洋参升华物结晶为菱针状。

人参4、分子鉴别
  PAPD即随机扩增的多态性DNA(Randomplified polymofrphic DNA),是美国的Williams与Welsh两个研究小组于1990年同时提出的一种DNA分子标记技术。RAPD技术建立在PCR(Polymerasechainreaction)技术基础上,它是以任意顺序列的寡核苷酸单链为引物,对所研究的基因组DNA进行随机扩增。利用RAPD技术可获得清晰的多态性DNA指纹图谱,能明显地区分易混中药材的差异。
  王培训等报道用DNA指纹图谱鉴别西洋参与人参的真伪,用随机扩增多态性DNA技术可对西洋参原药材及其制剂进行鉴别。罗志勇等报道用扩增片段长度多态性 DNA( amplifiedfragment length polymorphism,AFLP)法,将人参。西洋参干燥根的基因组DNA经EcoRI/Msel酶切,并与相应的人工接头连接后,使用选择性引物进行PCR扩增;经过变性聚丙酚胺凝胶电泳检测,成功地构建出多态性丰富和重复性好的人参、西洋参DNA指纹图谱,可用于人参、西洋参的药材鉴定方法。

人参5、结论
  西洋参和人参虽为同科同属的近缘种,性状、显微构造和化学成分相近,易于混淆不易区别。现代科学方法以薄层色谱法较为成熟,薄层色谱、电泳法、HPLC法和光谱法正逐步应用于西洋参和人参的鉴别,但相对比较繁杂,且易受环境条件的影响而最终影响鉴定结果。随着科学技术的发展应并探索更好更简便的方法。同时也需要几种方法共同使用鉴别真伪。目前对于西洋参和人参的研究还没有一种十分理想的手段。采用随机扩增多态DNA(RAPD)技术研究西洋参和人参及其常见伪品,扩增结果具有良好的分辨性,西洋参和人参间呈现明显指纹差异,根据这些多态性可进行鉴别。在这种思路指导下进一步深人完善,使西洋参和人参的鉴别工作趋于规范化。

摘自:《人参研究》2005年第1期
 
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