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作 者：杜景新、王丽、燕杰
摘 要：应用氨基酸自动分析仪，对中国林蛙各部位七种样品氨基酸含量进行测定。
结 果：必需氨基酸含量由高至低顺序为卵、活性油、肝脏、骨骼、腹膜皮、腹皮、背皮。
提 示：中国林蛙各部位均值得开发利用。
关键词：中国林蛙 氨基酸
 中国林蛙Rana temporaria chensinensis David 雌蛙输卵管－哈士蟆油，早已被广大患者所应用，而对其皮、骨、肝、卵等部位较忽视，它将约占林蛙体重60％白白废弃，实在可惜，对此我们对其氨基酸等成分进行了分析，现将氨基酸含量报道如下：
1、材料及试剂
1.1 样品
1.1.1 样品采集
吉林省通化县兴林产成龄中国林蛙，当年11月份捕获，剥取蛙油的同时，取其卵、骨、肝、皮（干后剥取腹皮、背皮、腹膜）。
l.l.2 样品加工
活性林蛙油粉制备：活体剥取林蛙油，用蒸馏水洗去血迹，立即放入试管中定型，放人冰箱冷冻，然后在冷冻干燥箱中干燥，即得活性林蛙油，再将此油粉碎过60目筛备用。
肝脏、骨骼、腹膜皮、腹皮、背皮制备：
将肝、骨、腹膜皮、腹皮、背皮等在50℃烘干后，反复粉碎过60目筛备用。
l.2 试剂
60mol/L盐酸；40mol/氢氧化锂；pH2.2的柠檬酸钠缓冲液；pH4.3的柠檬酸钠缓冲液；液氮；过甲酸试剂。上述盐酸为优级纯，其余试剂为分析纯，实验用水为去离子水。
2、仪器及方法
2.1 仪器
日立835－50型氨基酸自动分析仪。
2.2 方法
2.2.l 标准水解法
称取上述各样30mg，按氨基酸测定法水解，供除色氨酸和胱氨酸以外的十六种氨基酸用。
2.2.2 过甲酸水解法
取标准水解法中已定容50ml并过滤后的水解液2ml，加入2ml过甲酸试剂0℃放置16h，置于真空干燥器中真空中燥（40～50℃），残留物用2ml水蒸干，反复进行两次，最后用pH 2.2缓冲液溶解，供胱氨酸用。
2.2.3 碱水解法
精密称取60ml各样品置于聚乙烯管内，加入4mol/L氢氧化锂1ml，使样品均匀润湿，然后将管子放人水解管中，再放到液氮中冷冻，待成固体后接在真空泵的抽气管上，抽真空至7pa，封口。把水解管放在11O土1℃的恒温干燥箱内水解20h，取出冷却，将水解液定量转移到250ml容量瓶中，用6mol/L盐酸中和，再用pH4.3缓冲液定容，过滤后供测定色氨酸用。
2.3 测定条件
层析柱直径2.6mm,高105mm；离子交换树脂日立－2619型；分析时间72min；缓冲液流量0.225ml/min；茚三酮流量0.30ml/min；缓冲液泵压18～120kg/cm2；茚三酮流量15～35kg/cm2；缓冲液改变次数5（胱氨酸2，色氨酸2）；柱53℃；氮气压力0.28kg／cm2；进样量（样品）50μl,（标准品）3.00nmol/50μl。
3、结果
按上述条件上机测定，7种样品经数据处理后，所含各种氨基酸的含量结果见表1。
表１ 各种氨基酸百分含量(g/100g)
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腹皮 |
背皮 |
腹膜皮 |
骨骼 |
肝脏 |
卵 |
活性油 |
| 天冬氨酸 |
3.25 |
2.28 |
1.84 |
3.36 |
3.20 |
2.75 |
5.86 |
| 谷氨酸 |
2.62 |
1.34 |
1.49 |
2.66 |
2.41 |
2.63 |
3.91 |
| 丝氨酸 |
2.40 |
2.17 |
1.13 |
2.04 |
1.20 |
1.02 |
1.14 |
| 甘氨酸 |
5.27 |
3.80 |
2.24 |
1.08 |
4.55 |
4.31 |
2.00 |
| 苏氨酸* |
1.42 |
1.34 |
1.37 |
3.80 |
4.05 |
2.95 |
2.43 |
| 脯氨酸 |
1.70 |
3.79 |
1.44 |
2.78 |
3.48 |
2.36 |
4.35 |
| 丙氨酸 |
4.81 |
3.64 |
3.05 |
3.76 |
4.66 |
8.03 |
3.56 |
| 精氨酸* |
1.52 |
1.74 |
2.83 |
2.27 |
2.19 |
1.25 |
2.60 |
| 缬氨酸* |
2.16 |
1.35 |
1.57 |
2.53 |
3.71 |
5.45 |
4.89 |
| 蛋氨酸* |
0.82 |
0.90 |
1.03 |
0.74 |
1.62 |
1.08 |
1.86 |
| 胱氨酸 |
2.36 |
1.62 |
2.71 |
2.01 |
2.27 |
2.54 |
3.23 |
| 异亮氨酸* |
3.59 |
3.29 |
3.10 |
3.55 |
2.75 |
8.59 |
3.16 |
| 亮氨酸* |
1.38 |
1.10 |
0.96 |
2.40 |
3.89 |
2.37 |
2.14 |
| 苯丙氨酸* |
1.86 |
1.57 |
1.34 |
1.49 |
2.06 |
1.29 |
2.18 |
| 组氨酸* |
1.12 |
0.83 |
1.34 |
1.46 |
1.63 |
2.22 |
3.20 |
| 赖氨酸* |
2.46 |
2.07 |
1.96 |
2.58 |
2.64 |
3.19 |
2.96 |
| 酪氨酸 |
0.98 |
1.40 |
1.12 |
0.96 |
1.17 |
1.53 |
3.01 |
| 色氨酸* |
0.08 |
0.06 |
0.25 |
0.27 |
0.35 |
0.54 |
0.50 |
| 必需氨基酸总量 |
16.41 |
14.25 |
15.75 |
21.09 |
24.89 |
28.93 |
25.92 |
*为必需氨基酸
上述结果表明：必需氨基酸含量由高至低顺序为卵、活性油、肝脏、骨骼、腹皮。腹膜皮、背皮。其中含量最低的背皮含量较30年野山参含必需氨基酸的量（3.54）高4倍多，所以说林蛙全身是宝，值得开发。
摘 自：《人参研究》2003年第3期
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